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土壤幾丁質酶測試盒可見分光光度法

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  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2025-12-31
  • 訪  問  量:723

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

幾丁質主要存在于蝦、蟹、昆蟲等甲殼類動物的外殼與軟體動物的器官(例如烏賊的軟骨),以及真菌類的細胞壁中,而幾丁質酶(EC 3.2.1.14)可催化幾丁質水解,具有抵御真菌侵染的作用,成為抗真菌病害的研究熱點。

測定原理

幾丁質酶水解幾丁質產生N-乙酰氨基葡萄糖,進一步與對二甲氨基產生紅色化合物,在585nm處有特征吸收峰,吸光值增加速率反映了幾丁質酶的活性。

自備實驗用品及儀器

天平、水浴鍋、離心機、震蕩儀、可見分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板,甲苯、蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

土壤幾丁質酶測試盒可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

BK-01S6869

11.png 

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

500mL Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X Tris-Tricine-SDS Running Buffer,Cathode,10X 常溫保存

1mL 抗Ⅲ,10mg/mL Antithrombin III Solution 4℃一周內穩定

2 ug pTYB 4 pTYB 4 低溫運輸,-20℃保存

50次 柱式毛發DNAout Column Hair DNAOUT 常溫保存(蛋白K溶液需要-20℃保存)

2 ug pEGFP-Mem pEGFP-Mem 低溫運輸,-20℃保存

GYP白亞瓊脂 GYP Medium 250g

5g 胸腺核苷 Thymidine 室溫干燥避光保存

50T 豬、牛、羊布魯氏菌病PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

100次 雙熒光素報告基因檢測試劑盒 Dual Luciferase Assay Kit -20℃或-80℃避光保存

100mL Imidazole Buffer(咪唑緩沖液),0.5M,pH7.4   Imidazole Buffer,0.5M,pH7.4   常溫保存

50次 cDNA鏈合成試劑盒 1st-Strand cDNA Synthesis Kit -20℃保存

土壤幾丁質酶測試盒可見分光光度法STMN3  原基因18家族STMN3蛋白抗體 規格: 0.1ml

Donkey Anti-Goat IgG/Gold  膠體金標記的驢抗羊IgG 規格: 0.5ml

Metronidazole(1C2)  單克隆抗體 規格: 0.2ml

Protein Z  蛋白Z抗體 規格: 0.2ml

PHKB  磷酸化β抗體 規格: 0.2ml

IL-3  白介素3抗體 規格: 0.2ml

SEMA4A  跨膜蛋白SEMA4A抗體 規格: 0.2ml

TCF3/E2A/E47  轉錄因子3抗體(螺旋環螺旋蛋白HE47) 規格: 0.2ml

NKB  神經激肽B抗體 規格: 0.2ml

Phospho-FAK(Tyr576/577)  磷酸化粘著斑激抗體 規格: 0.1ml

GGT1/CD224  γ谷氨酰轉移抗體 0.1ml

Mre11/HNGS1  DNA損傷關鍵蛋白Mre11抗體 規格: 0.2ml

 


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